产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
土壤中性蛋白酶(Solid - Neutral Protease,S-NPT)试剂盒 | 分光光度法 | 50管/24样 | CS-01S63490 |
土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化,其水解产物是高等植物的氮源之一。S-NPT在中性环境下催化蛋白质水解,与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。
测定原理:
中性条件下,S-NPT可将酪蛋白水解产生酪氨酸;在碱性条件下,酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝;在680nm有特征吸收峰。
实验中所需仪器及设备:
可见分光光度计、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、1ml玻璃比色皿、蒸馏水
试剂组成和配置:
试剂一:液体20mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入6ml蒸馏水充分溶解;用不完的试剂4℃保存;
试剂三:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入2mL试剂七,沸水浴加热溶解,然后加入8ml试剂一,充分混匀备用,用不完的试剂4℃保存;
试剂四:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入40ml蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂4℃保存;
试剂五:液体10mL×1瓶,4℃保存;
试剂六:液体1.5mL×1支,0.05mg/ml标准酪氨酸溶液,4℃保存;
试剂七:液体5mL×1瓶,4℃保存;
样品处理:
新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。
测定操作:
1、分光光度计预热30min以上,调节波长至680nm,蒸馏水调零。
2、样本测定:
混匀,40℃水浴20min,8000g 25℃离心10min,取上清液1mL,680nm下读取各管吸光值A
注意:标准管只需测一次。每个测定管设一个对照管。
S-NPT活性计算:
单位定义:每天每g土样中产生1mg酪氨酸为一个 S-NPT活力单位。
S-NPT(mg/d/g土样)=C标准×(A测定管-A对照管)÷A标准管×V反总÷W÷T=24×(A测定管-A对照管)÷A标准管
C标准管:标准管浓度,0.05mg/mL;V反总:反应体系总体积,0.4mL;T:反应时间,30min=1/48d; W:样本质量,0.04g。
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