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生化检测试剂盒 > 分光检测试剂盒 > 过氧化氢酶(Catalase,CAT)试剂盒(钼酸铵比色法)分光光度法50管/48样
产品名称:
过氧化氢酶(Catalase,CAT)试剂盒(钼酸铵比色法)分光光度法50管/48样
型号:
CS-01S63537
生产地址
进口、国产
产品价格
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产品简介
过氧化氢酶(Catalase,CAT)试剂盒(钼酸铵比色法)质量可靠、价格优惠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点。
产品详情

一、概述:

 公司上万种科研产品,主要供应各大科研单位和学校,是国内众多科研单位的供应商。公司严把质量关,确保每一个出厂产品质量合格,让您买的省心,用得放心。

产品名称

检测方法

规格

货号

过氧化氢酶(Catalase,CAT)试剂盒(钼酸铵比色法)

分光光度法

50/48

CS-0163537

 注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:

CAT(EC 1.11.1.6)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是最主要的H2O2清除酶,在活性氧清除系统中具有重要作用。

商品介绍:

测定原理:

过氧化氢能氧化MoO42-MoO52-,MoO52-接受氢氧根的电子成键,分子间立即脱水缩合,得到稳定的黄色复合物(H2MoO4XH2O)n405nm处有强烈吸收峰,其吸光值和过氧化氢浓度成线性关系。测定出体系剩余过氧化氢在405nm的吸光值即可反映CAT的催化活性。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水

试剂组成和配制:

提取液:液体60 mL×1瓶,4℃保存;

试剂一:液体6 mL×1瓶,4℃避光保存;

试剂二:液体18 mL×1瓶,常温保存;

试剂三:液体45 mL×1瓶,4℃保存;

粗酶液提取:

1、细菌、细胞或组织样品的制备:

细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~10001的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2、血清(浆)样品:直接检测。

测定步骤:

1、分光光度计预热30min以上,调节波长至405 nm

2、在EP管中加入下列试剂

CAT活性计算:

1、标准曲线:y = 0.18x + 0.0013      R2 = 1      x:体系中过氧化氢浓度变化值(μmol/mL

y:吸光值差值ΔA

2、血清(浆)CAT活力的计算:

单位的定义:每毫升血清(浆)每分钟催化1μmol H2O2降解定义为一个酶活力单位。

CAT(μmol /min/mL)= =(ΔA-0.0013)÷0.18×V反总÷V样÷T

=222.22×(ΔA-0.0013)

3、组织、细菌或细胞中CAT活力计算:

1)按样本蛋白浓度计算:

单位的定义:每mg组织蛋白每分钟催化1μmol H2O2降解定义为一个酶活力单位。

CAT(μmol/min/mg prot)=(ΔA-0.0013)÷0.18×V反总÷(V样×Cpr) ÷T

=222.22×(ΔA-0.0013)÷Cpr

2)按样本鲜重计算:

单位的定义:每g组织每分钟催化1μmol H2O2降解定义为一个酶活力单位。

CAT(μmol/min/g 鲜重)=(ΔA-0.0013)÷0.18×V÷(W× V样÷V样总)÷T

=222.22×(ΔA-0.0013)÷W

V反总:反应体系总体积,1.2 mLV样:加入样本体积,0.015 mLV样总:加入提取液体积,1 mLT:反应时间,2 minW:样本质量,gCpr:样本蛋白质浓度,mg/mL

注意事项:

1、预实验若发现酶活性过高(A测定<0.1),可用提取液适当稀释样品后测定,并在计算公式中乘以相应稀释倍数。

2、若A空白<A测定,一方面可能是酶活性过低,可将反应时间2延长到5min,另一方面可能样本中杂质干扰严重,可将样本稀释5倍左右后测定,并在计算公式中代入实际反应时间和乘以相应稀释倍数。

注意:
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

标签:过氧化氢酶(Catalase CAT)试剂盒(钼酸铵比色法) 

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