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生化检测试剂盒 > 分光检测试剂盒 > 酸性磷酸酶(ACP)活性测定试剂盒分光光度法50管/24样
产品名称:
酸性磷酸酶(ACP)活性测定试剂盒分光光度法50管/24样
型号:
CS-01S63562
生产地址
进口、国产
产品价格
电议
产品简介
酸性磷酸酶(ACP)活性测定试剂盒质量可靠、价格优惠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点。
产品详情

一、概述:

 公司上万种科研产品,主要供应各大科研单位和学校,是国内众多科研单位的供应商。公司严把质量关,确保每一个出厂产品质量合格,让您买的省心,用得放心。

产品名称

检测方法

规格

货号

酸性磷酸酶(ACP)活性测定试剂盒

分光光度法

50/24

CS-0163562

 注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:

ACP在酸性条件下催化磷酸单酯水解称无机磷酸,常见于巨噬细胞的溶酶体内。ACP常用于前列腺癌的辅助诊断。

商品介绍:

测定原理:

在酸性环境中,ACP催化对硝基苯磷酸二钠水解生成4-硝基苯酚,在405nm有特征光吸收;通过测定405nm吸光度增加速率,来计算ACP活性。

自备仪器和用品:

可见分光光度计、台式离心机、分析天平、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、冰、可调式移液器和蒸馏水。

试剂组成和配制:

试剂一:液体60mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体25mL×1瓶,4℃保存。

试剂三:液体25mL×1瓶,4℃保存。

粗酶液提取:

1.组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)15~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆,4℃、10000g离心10min,取上清液待测。

2.细菌或细胞:按照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~10001的比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后10000g4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。

3.血液可直接测定,或者适当稀释后测定。

测定:

1. 分光光度计预热30 min,调节波长到405 nm

2. EP 管中加入下列试剂

ACP活性计算:

标准曲线 y = 14.6672x + 0.0179R2 = 0.9996x为标准品浓度(μmol/mL),y为吸光值ΔA

1. 血液中ACP活性计算

活性单位定义:30℃中每毫升血液每分钟催化产生1μmol 4-硝基苯酚定义为1个酶活单位。

ACP活力(μmol/min/mL)=(ΔA-0.0179)÷14.6672 ×V反总÷T÷V

= 0.2273 ×(ΔA-0.0179

2. 组织、细菌或细胞中ACP活性计算

1)按照蛋白浓度计算

活性单位定义:30℃中每毫克蛋白每分钟催化产生1 μmol 4-硝基苯酚定义为1个酶活单位。

ACP活力(μmol/min/mg prot)=(ΔA-0.0179)÷14.6672×V反总÷T÷(V样×Cpr)

=0.2273 ×(ΔA-0.0179)÷Cpr

2)按照样本质量计算

活性单位定义:30℃中每克组织每分钟催化产生1 μ mol 4-硝基苯酚定义为1个酶活单位。

ACP活力 (μmol/min/g 鲜重)=(ΔA-0.0179)÷14.6672×V反总÷T÷(W×V 样÷V 样总)

= 0.2273 ×(ΔA-0.0179)÷W

3)按照细菌或细胞数量计算

活性单位定义:30℃中每104个细菌或细胞每分钟催化产生1 μ mol 4-硝基苯酚定义为1个酶活单位。

ACP活力 (μmol/min/104 cell)=(ΔA-0.0179)÷14.6672 ×V反总÷T ÷(细胞数量×V 样÷V 样总)

= 0.2273 ×(ΔA-0.0179)÷细胞数量

V反总:反应体系总体积(mL),1 mL W :样品质量,g V样:加入反应体系中样本体积(mL),0.01 mLV样总:提取液体积,1 mLT:反应时间(min),30 min500:细胞或细菌总数,500万。

注意事项:

ACP不稳定,尤其在37℃和pH大于7的条件下活力丧失快,因此酸性磷酸酶样品一般需当天准备;血清样品中,每毫升血清中加入10mg柠檬酸氢二钠或者5mg硫酸氢钠,使pH降至6.5以下,或5ml血清加入30%醋酸溶液23滴,置于4℃可保存1周。

注意:
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

标签:酸性磷酸酶(ACP)活性测定试剂盒 

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