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生化检测试剂盒 > 分光检测试剂盒 > 吲哚乙酸氧化酶活性测定试剂盒分光光度法50T/48S
产品名称:
吲哚乙酸氧化酶活性测定试剂盒分光光度法50T/48S
型号:
CS-01S63561
生产地址
进口、国产
产品价格
电议
产品简介
吲哚乙酸氧化酶活性测定试剂盒质量可靠、价格优惠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点。
产品详情

一、概述:

 公司上万种科研产品,主要供应各大科研单位和学校,是国内众多科研单位的供应商。公司严把质量关,确保每一个出厂产品质量合格,让您买的省心,用得放心。

产品名称

检测方法

规格

货号

吲哚乙酸氧化酶活性测定试剂盒

分光光度法

50T/48S

CS-0163561

 注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:

吲哚乙酸(IAA)在吲哚乙酸氧化酶的作用下,被氧化破坏失去活性。植物体内吲哚乙酸氧化酶活力的大小,对调节体内吲哚乙酸的水平,起着重要的作用,而影响植物的生长。

商品介绍:

测定原理:

在无机酸存在情况下,吲哚乙酸能与FeCl3作用,生成红色螯合物,该物质在530nm处有最大吸收峰,酶活力的大小可以其破坏吲哚乙酸的速度表示之。吲哚乙酸的含量可用比色法测定。

自备仪器和用品:

低温离心机、水浴锅、可调节移液器、可见分光光度计/酶标仪、1.5mL离心管、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸馏水。

试剂组成和配制:

试剂一:液体120mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体10mL×1瓶,4℃保存。

试剂三:液体10mL×1瓶,4℃保存。

试剂四:液体10mL×1瓶,4℃保存。

试剂五:液体2mL×1瓶,4℃避光保存。

试剂六:液体50mL×1瓶,4℃保存。临用前吸取1mL试剂五加入试剂六中混匀,待用,避光保存

粗酶液提取:

1.组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)15~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆。8000g4℃离心10min,取上清置冰上待测。

2.细菌、真菌:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~10001的比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后8000g4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。

3.血清等液体:直接测定。

测定操作:

1. 分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长到530 nm,蒸馏水调零。

2. 试剂二、试剂三、试剂四置于25℃(一般物种)或者37℃(哺乳动物)水浴中保温20min

3. 1.5mL EP管若干,操作表如下:

IAA氧化酶活性计算公式:

a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下

IAA标准曲线公式:y = 1.334x + 0.025  R2 = 0.998 xIAA浓度,mmol /Ly为吸光值)

1)按蛋白浓度计算

酶活定义:从开始时加入的IAA量减去酶作用后残留的IAA含量,即得被酶所催化的IAA含量。以每mg酶蛋白在1h内分解破坏的吲哚乙酸量表示酶活力大小。

U(μmol/h/mg prot=[(A1-0.025) ÷1.334-(A2-0.025) ÷1.334] ×V样÷(V样×Cpr)÷T

=1.5×(A1-A2)÷Cpr

2)按样本鲜重计算

酶活定义:以每g样本在1h内分解破坏的吲哚乙酸量表示酶活力大小。

U(μmol/h/g 鲜重)=[(A1-0.025) ÷1.334-(A2-0.025) ÷1.334] ×V样÷(V样÷V样总×W) ÷T

=1.5×(A1-A2)÷W

3)按细胞数量计算

酶活定义:以每1万个细胞在1h内分解破坏的吲哚乙酸量表示酶活力大小。

U(μmol/h/104 cell=[(A1-0.025) ÷1.334-(A2-0.025) ÷1.334] ×V样÷(V样÷V样总×W) ÷T

=1.5×(A1-A2)÷细胞数量

4)按液体体积计算

酶活定义:以每mL酶液在1h内分解破坏的吲哚乙酸量表示酶活力大小。

U(μmol/h/mL=[(A1-0.025) ÷1.334-(A2-0.025) ÷1.334] ×V样÷(V样÷V样总) ÷T

=1.5×(A1-A2

V样总:上清液总体积,1mLV样:加入反应体系中上清液体积,20μL=0.02 mLCpr:上清液蛋白质浓度,mg/mLW:样品质量,gT:反应时间,0.5h

注意事项:

1.最低检出限为0.01μmol/mL

注意:
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

标签:吲哚乙酸氧化酶活性测定试剂盒 

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