中文名称:即用型免疫组化试剂盒(兔源一抗)(冰冻切片/石蜡切片)
英文名称:Instant Immunohistochemistry Kit For Primary Antibody From Rabbit IgG
产品规格:80T|160T
发货周期:1~3天
本试剂盒采用SABC系统,适用一抗为兔IgG,标本为培养细胞或冰冻切片的免疫组化。SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的,用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素对生物素分子有极高的亲和力,等电点 pI=6.0~6.5,对组织和细胞的非特异吸附很低。根据研究,大量的过氧化物酶可以保证SABC具有很高的敏感性。所以SABC兼具高敏感性,低背景和操作简便的优点。
冰冻切片和培养细胞做免疫组化时,由于内源性抗体的抗原性完好保存,一般免疫组化试剂盒就会碰到严重的背景染色问题,尤其是丙酮固定的标本。本试剂盒所用的二抗是生物素标记的抗兔IgG,具有高度的特异性,不和兔以外任何抗体起反应,所以不会因二抗引起背景染色。此外,本试剂盒也能用于兔标本石蜡切片的免疫组化,背景染色优于普通试剂盒。
保存条件:4℃可保存一年,应避免冷冻。
冰冻切片染色步骤:
1. 取出切片,浸于 PBS 中复温30分钟。
2. 灭活。30%H2O2 1 份+纯甲醇 50 份混合,室温浸泡10分钟,以灭活内源性过氧化物酶。蒸馏水洗1-2 次。
3. 根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
4. 封闭。5%BSA封闭液 37℃孵育30分钟,甩干,勿洗。
5. 滴加一抗(兔IgG),37℃孵育1-2小时或4℃过夜。PBS冲洗,5分钟×3次。
6. 滴加生物素标记抗兔IgG,37℃孵育 30分钟。PBS冲洗,5分钟×3次。
7. 滴加 SABC,37℃孵育30分钟。PBS冲洗,5分钟×3次。
8. 显色液显色,镜下控制反应时间。显色剂可选DAB(ZN1968)或AEC(ZN1963)。自来水充分冲洗。
9. 根据需要进行苏木素(ZN1971)复染,染色时间为0.5-2分钟。脱水,透明。
10. 选用中性树胶,水溶性封片剂(ZN2946)或其他适当的封片剂封片。