英文名称：Double chromogenic Immunofluorescence kit for mouse IgM(DyLight488&POD)

产品规格：1ml|2ml|5ml

发货周期：1～3天

本试剂盒适于一抗来源为小鼠的IgM型抗体，是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的。链霉亲和素同亲和素一样，对生物素分子有极高的亲和力，是一般抗原抗体亲和力的一百万倍，兼具高敏感性，低背景和操作简便的优点。此免疫组化双显色试剂盒采用荧光素 DyLight 488 与过氧化物酶(POD)标记的链酶亲和素（SABC-DyLight 488+POD）。DyLight 是一种近年来被广泛应用的新型荧光染料，具有很好的光谱宽度、更强的荧光强度，更高的抗淬灭性和特异性，对 pH 不敏感、分子较小渗透性好等优势。DyLight 488 最大吸收峰 493nm；最大发射峰 518nm。呈黄绿色。加入显色剂 DAB 显色后，染色呈棕黄色。用户根据实验需要，可在同一张切片上用两套显示系统观察。

保存条件：4℃可保存一年，应避免冷冻。

石蜡片染色步骤：

1. 石蜡切片，常规脱蜡至水。

2. 3%H2O2去离子水室温孵育5-10分钟,以消除内源性过氧化物酶活性.PBS冲洗，5分钟×3次。

3. 根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。

4. 封闭。滴加用稀释后的正常山羊血清封闭液(稀释比 1:10)，37℃孵育30分钟，甩干，勿洗。

5. 滴加一抗(小鼠 IgM)，37℃孵育1-2小时或4℃过夜。PBS冲洗，5分钟×3次。

6. 滴加生物素化山羊抗小鼠 IgM，37℃孵育30分钟。PBS冲洗，5分钟×3次。

7. 滴加SABC-DyLight 488(参考效价1:200-800)或SABC-POD(参考效价1:100)，37℃孵育30分钟。PBS冲洗，5分钟×3次。

8. 显色液显色，镜下控制反应时间。显色剂可选DAB(ZN1968)。自来水充分冲洗。

9. 根据需要进行苏木素(ZN1971)复染，染色时间为0.5-2分钟。选用中性树胶，水溶性封片剂(ZN2946)或抗荧光衰减封片剂(ZN1974)封片。

10. 结果观察。荧光显微镜下有黄绿色颗粒者为阳性染色。普通光学显微镜下有棕黄色颗粒者为阳性染色。