中文名称:双显色抗小鼠IgM免疫组化试剂盒(CY3和过氧化物酶)
英文名称:Double chromogenic Immunofluorescence kit for Mouse IgM(Cy3&POD)
产品规格:1ml|2ml|5ml
发货周期:1~3天
本试剂盒是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的。链霉亲和素同亲和素一样,对生物素分子有极高的亲和力,是一般抗原抗体亲和力的一百万倍,兼具高敏感性,低背景和操作简便的优点。CY3 比传统上的荧光更具有亲水性,因而不会因疏水性而引起非特异性吸附或聚合,从而背景更低。而且其敏感性和稳定性都更好。CY3 在 554nm 激化,在 568-574nm 发射荧光,呈鲜红色。免疫组化双显色试剂盒采用 CY3+过氧化物酶 POD 标记的链酶亲和素(SABC-CY3+POD),用户根据实验需要,可在同一张切片上用两套显示系统观察。
保存条件:4℃可保存一年,应避免冷冻。
石蜡片染色步骤:
1. 石蜡切片,常规脱蜡至水。
2. 3%H2O2去离子水室温孵育5-10分钟,以消除内源性过氧化物酶活性,PBS冲洗,5分钟×3次。
3. 根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
4. 封闭。滴加用稀释后的正常山羊血清封闭液(稀释比 1:10),37℃孵育30分钟,甩干,勿洗。
5. 滴加一抗(小鼠 IgM),37℃孵育1-2小时或4℃过夜。PBS冲洗,5分钟×3次。
6. 滴加生物素化山羊抗小鼠 IgM,37℃孵育30分钟。PBS冲洗,5分钟×3次。
7. 滴加 SABC-Cy3(参考效价1:100)或SABC-POD(参考效价1:100),37℃孵育30分钟。PBS冲洗,5分钟×3次。
8. 显色液显色,镜下控制反应时间。显色剂可选DAB(ZN1968)。自来水充分冲洗。
9. 根据需要进行苏木素(ZN1971)复染,染色时间为0.5-2分钟。选用中性树胶,水溶性封片剂(ZN2946)或抗荧光衰减封片剂(ZN1974)封片。
10. 结果观察。荧光显微镜下有黄绿色颗粒者为阳性染色。普通光学显微镜下有棕黄色颗粒者为阳性染色。