英文名称:
产品规格:100ml
发货周期:1~3天
规格说明:一个包装的本产品可以配制成 1000 毫升抗原修复液(1×)。按照每张标本需 10ml 抗原修复液(1×)计算,一个包装的本产品约可用于100 个样品。
产品用途:本产品特别适合用于石蜡切片,也可以用于冰冻切片等其它样品。
保存条件:4℃或-20℃保存,一年有效
产品简介:
EDTA抗原修复液(EDTA Antigen Retrieval Solution)是一种常用的抗原修复液,可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。
细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后,组织中的许多氨基酸残基形成醛键、羧甲键而封闭了部分抗原决定簇,同时蛋白之间发生交联也使抗原决定簇隐蔽。导致免疫染色时染色信号减弱,甚至出现一些假阳性染色结果。因此,对于石蜡切片,要求在进行 IHC 染色前,先进行抗原修复,即将固定时分子之间所形成的交联破坏,恢复抗原的原有空间形态。EDTA 缓冲液是除柠檬酸缓冲液外另一种常用的IHC 抗原修复液。有部分抗原用 EDTA 缓冲液修复效果好于柠檬酸缓冲液。特别是对于某些核抗原效果会更明显。
本抗原修复液采用了广泛使用的EDTA,可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。
通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果,但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时,可以考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看,无论冰冻切片还是细胞爬片等,只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品,进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联,充分暴露抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。
使用方法:
1.对于石蜡切片:
①切片脱蜡至水。
②3%H2O2处理切片10分钟。
③自来水冲洗,蒸馏水洗。
④ 抗原修复:将切片浸泡在抗原修复液(1×)中,95-100℃加热约 15分钟(加热时间可以控制在 10-20分钟内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在 20-30分钟内冷却至室温。PBS洗3次,随后按选好的免疫组织化学染色方法进行染色。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
2.对于冰冻切片:
用免疫染色洗涤液洗涤切片 5分钟。将切片浸泡在抗原修复液(1×)中,95-100℃加热约 15分钟(加热时间可以控制在 10-20分钟内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。如果微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在 20-30分钟内冷却至室温。PBS洗3次,随后按选好的免疫组织化学染色方法进行染色。
3.对于其它样品的抗原修复,可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。
注意事项:
1.本抗原修复液使用前必须用重蒸水稀释 10倍,配制成抗原修复液(1×)。
2.请使用足量的修复液,修复过程中保证组织切片完全浸没在修复液中。
3.根据你的切片具体情况选择修复时间,如组织粘片不牢,容易掉片,请酌情减少修复时间。
4.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。