英文名称：Immunohischemistry Kit for Mouse Primary Antibody

产品规格：150T

发货周期：1～3天

本试剂盒可用于检测以小鼠单克隆或多克隆抗体为一抗的免疫组化实验，检测原理基于高特异性高亲和力的链霉亲和素-生物素结合：已固定或培养细胞的抗原与一抗形成抗原抗体复合物，生物素化二抗特异性结合上述复合物，经辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素特异性识别生物素（即抗原所在位置），最后经辣根过氧化物酶底物显色即可检测相应抗原。

本品可适用于多种类型样本，如石蜡包埋切片、冰冻切片、培养细胞涂片及血液标本等。

产品组份：

封闭液————————————7.5ml

生物素标记抗小鼠二抗————7.5ml

HRP 标记链霉亲和素————7.5ml

20×DAB底物缓冲液————400µl

20×H2O2浓缩液————400µl

20×DAB浓缩液————400µl

使用方法

1 样品准备

染色前用PBS浸泡组织或细胞涂片10min。石蜡切片于室温下用二甲苯常规脱蜡、入水、抗原修复。

【注】：从此步骤起，严禁标本或组织切片干燥。

2 染色（以石蜡切片为例）

1）将处理好的石蜡切片放入3% H2O2-甲醇溶液中浸泡10min，以消除内源性过氧化氢酶的作用。

2）清洗：PBS清洗3次，2 min/次。

3）封闭：加一滴封闭液于组织切片上（需完全覆盖待检组织）孵育10min。

4）倒掉或吸干液体（不要冲洗）。

5）一抗：每张切片加2滴（100μl）或适量一抗（需完全覆盖待检组织），湿盒内孵育30-60min。

6）清洗：PBS清洗3次，2 min/次。

7）二抗：每张切片加一滴生物素标记抗小鼠二抗（需完全覆盖待检组织），孵育10min。

8）清洗：PBS清洗3次，2 min/次。

9）酶孵育：每张切片加一滴HRP标记链霉亲和素（需完全覆盖待检组织），孵育10分钟。

10）清洗：PBS清洗3次，2 min/次。

11）制备DAB显色液。

按照【20×DAB浓缩液：20×H2O2浓缩液：20×DAB底物缓冲液：水=1:1:1:20】的比例进行配制显色液，以1张切片为例，分别吸取上述3种溶液各2.5µl溶于50µl去离子水中，充分混匀即可。

【注】：

① DAB显色液需现配现用，避光放置，且在30min内使用。

② 可根据需要一次染多张切片，各种试剂量按照上述比例放大即可。

12）显色：向切片上滴加一滴上述DAB显色液，室温显色2-5min（此步可在显微镜下控制显色程度）。

13）自来水充分冲洗。

14）用合适复染剂复染，盐酸酒精分化。

15）继续后续脱水、透明、封片、镜检。