英文名称:
产品规格:1包
发货周期:1~3天
产品规格:0.20μm 13.5cm×10cm/张 10张/包
产品保存:室温干燥保存,一年有效。
产品简介:该膜特别适用于凝胶电印迹后的膜上的蛋白质的测序和免疫检测,特别是对于分子量小于 20KD的蛋白质。膜与湿式和半干式电印迹系统兼容。
注意事项:
1.凝胶电泳后,将胶在转移缓冲液中平衡 10分钟(对于厚度大于 0.75mm的凝胶,20分钟)。
2.将平衡的凝胶与湿膜直接接触,去除凝胶和膜之间可能形成的气泡。
3.将膜/凝胶三明治放入电印迹装置中,根据您的具体应用进行印迹程序。
4.为了增强膜与低分子量蛋白质的结合(<20KD),在转移缓冲液中加入 20-30%的甲醇,降低外加电流。
5.膜转印完之后如需要染色剂染色,需要将膜用甲醇浸润 15 秒之后再染色。
需要材料:
1.膜切割成凝胶的尺寸
2.甲醇润湿干膜
3.纯水
4.转移缓冲液:用于湿转的25mM Tris,192mM 甘氨酸,pH8.3,10%甲醇或用于半干转移的48mMTris,39mM 甘氨酸,pH9.2,10%甲醇
5.将滤纸片切割成凝胶的尺寸并浸泡在转印缓冲液中至少 30 秒
6.含有 0.5-5%(w/ v)(牛血清白蛋白,酪蛋白,脱脂奶粉)的封闭液
7.洗涤缓冲液:含有 0.05-0.1%Tween-20的PBS或TBS
PBS:10mM 磷酸钠,pH7.2,0.9%NaCl
TBS:10mM Tris,pH7.4,0.9%NaCl
8.在封闭缓冲液或洗涤缓冲液中稀释的一抗
9.在封闭缓冲液或洗涤缓冲液中稀释的酶标二抗
使用说明:
1.将膜置于甲醇中 15 秒。当膜潮湿时,膜将从不透明的白色变成均匀,半透明的灰色。
2.将膜浸入水中 1-2分钟以置换甲醇。如果膜漂浮在水面上,用镊子将其推入水中,直到它被淹没。
3.将膜浸泡在转移缓冲液中 5分钟以置换水。膜已经可以用于转印。
免疫检测:
1.如果印迹膜干燥,用甲醇将其再湿润 15 秒,直到它从不透明的白色变成半透明的灰色。
2.用纯水洗1分钟。
3.将印迹膜置于封闭缓冲液中,温和搅拌孵育1 小时。在洗涤或封闭缓冲液中制备一抗溶液。
4.将印迹膜置于稀释的一抗溶液中,温和搅拌孵育1 小时。
5.用洗涤缓冲液洗3-5次,每次 5分钟。在洗涤或封闭缓冲液中制备二抗溶液。
6.将印迹膜置于稀释的二抗溶液中,温和搅拌孵育1 小时。
7.用洗涤缓冲液洗3-5次,每次 5分钟。