荧光染料Hoechst 33342 具有一定的细胞膜透性,能少许进入正常细胞膜,使其染上低蓝色。Hoechst33342 可以用来复染细胞的细胞核。
对于非固定的活细胞来说,hoechst33342 可以起到区别凋亡和正常细胞的作用,因为凋亡细胞的膜通透性增强,因此进入细胞中的Hoechst 33342 比正常细胞的多,荧光强度要比正常细胞中要高,此外,凋亡细胞的染色体DNA 对于细胞的称染来说,可以配以适当的0.1% Triton X-100 通透,从而是所有细胞细胞核有效的染上hoechst 染料。
注意事项
1. 本产品1mg/mL 浓度可以即用。如需更小浓度, 可以10mM PBS , pH7.2 溶液稀释1mg/mLHoechst33342 溶液,染料工作液采用室温孵育即可。
2. 用Hoechst 33342 染料与细胞孵育的时间不宜过长,一般控制在20min 之内为宜。如果太长可引起Hoechst 33342 的发射光谱由蓝光向红光的迁移,从而影响结果的判断。
3. 染料有毒,操作时要戴手套。
4. 荧光显微镜观察:Hoechst 33342 用氪激光激发的紫外光,激发波长为352nm,发射波长为400~500nm,产生蓝色荧光。
储存:4℃,避光,有效期6个月。