细胞凋亡时产生最显著的变化是染色体固缩，DNA 裂解使细胞核形态产发生变化。荧光染料Hoechst33258 是一种无毒、水溶性双苯咪唑类化合物，可作为荧光探针与DNA 分子结合。
在凋亡细胞中，细胞膜对Hoechst 33258 的摄取增高，并且由于染色体高度浓缩，Hoechst 33258 与之结合增强，染色呈强蓝色荧光，而正常细胞只呈微弱荧光，死细胞则不被染色，由此可检测出凋亡。
注意事项
1. 染色时间严格控制，染色过久可导致假阳性。
2. 由于不同细胞对Hoechst 33258 的摄取能力不同，该法不一定适用所有细胞。
操作方法(以下操作针对细胞爬片进行)
1. 培养细胞并爬片；
2. 用冷PBS 洗涤细胞二次（贴壁细胞原位固定染色）
3. 加入500μL 的4%甲醛溶液(用户自备)，4℃固定细胞10-30min；
4. 洗去固定液，用PBS 洗两遍；
5. 滴加100μL Hoechst 33258 染色液，室温染色10 min，水冲净晾干；
6. 滴加一滴防淬灭封片液覆盖样本；
7. 以紫外光340nm 波长激发，发射波长为460nm，可以在荧光显微镜下观察。
储存：4℃，避光，有效期6个月。
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