吖啶橙是一种荧光色素,其检测激发滤光片波长488nm。阻断滤光片波长515nm。它与细胞中DNA 和RNA 结合量存在差别,可发出不同颜色的荧光,与DNA 结合量少发绿色荧光,与RNA 结合量多发桔黄色或桔红色荧光。该染料具有膜通透性,能透过细胞膜,使核DNA 和RNA 染色。
在荧光显微镜下观察,吖啶橙可透过正常细胞膜,使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光;而在凋亡细胞中,因染色质固缩或断裂为大小不等的片断,形成凋亡小体。吖啶橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光,或黄绿色碎片颗粒;而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。吖啶橙AO 常与溴化乙啶EB 合用双染,因EB 只染死细胞使之产生桔黄色荧光,由此可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。
用于细胞核染色时,推荐的吖啶橙工作浓度为0.1%。一般孵育条件是室温避光15 分钟。由于不同细胞对吖啶橙的摄取能力不同,该法不一定适用所有细胞。
储存:-20℃,避光,有效期12月。