本试剂盒是一种对溶酶体中酸性β-半乳糖苷酶进行染色检测的试剂盒,常用作细胞衰老检测时的对照。在普通的光学显微镜下就可以观测到细胞或组织中溶酶体酸性β-半乳糖苷酶的活力水平情况。本试剂盒可以用于培养细胞的检测,也可以用于组织切片的检测。
试剂盒组分:
β-半乳糖苷酶染色固定液—————100ml
X-Gal溶液————————————5ml
β-半乳糖苷酶染色液A——————1ml
β-半乳糖苷酶染色液B——————1ml
β-半乳糖苷酶染色液C——————100ml
绝大多数正常细胞都可以检测到较高水平的溶酶体β-半乳糖苷酶活性水平。可以用作细胞衰老β-半乳糖苷酶染色时的参考染色。细胞衰老特异的β-半乳糖苷酶仅在衰老时表达,而溶酶体β-半乳糖苷酶几乎在任何情况下都表达。
我公司的溶酶体β-半乳糖苷酶染色试剂盒,以X-Gal为底物,在溶酶体酸性β-半乳糖苷酶的催化下会生成深蓝色产物。从而在光学显微镜下很容易观察到变成蓝色的表达β-半乳糖苷酶的细胞或组织。
本试剂盒仅染色溶酶体酸性β-半乳糖苷酶,不会染色衰老特异性的β-半乳糖苷酶,也不会染色外源转染表达的用于报告基因的β-半乳糖苷酶(大肠杆菌的β-半乳糖苷酶)。
如果使用6孔板检测,足够测定100个样品;使用24孔板测定,足够测定400个样品;使用96孔板测定,足够测定1000个样品。对于组织切片或组织块,可以检测的样品数量视样品的大小而定。对于普通的切片也至少足够检测100个样品。
注意事项:
1. β-半乳糖苷酶染色固定液有一定的腐蚀性和毒性,操作时请注意防护。
2. β-半乳糖苷酶染色液B在刚刚溶解后会观察到有沉淀,属正常现象,充分混匀或Vortex后,沉淀会全部溶解。作为常规,试剂使用前必须确保沉淀全部溶解,并且混匀。
3. 配制染色工作液时需使用聚丙烯(polypropylene)容器或玻璃容器,不宜使用聚苯乙烯(polystyrene)容器。但染色时可以在聚苯乙烯(polystyrene)容器中进行,例如普通的6孔板就可以用作染色的容器。
储存条件:-20℃,有效期一年。