Percoll是一种适用性广且操作灵活简单的低密度梯度分离液,可用来分离细胞,亚细胞颗粒,细菌,病毒,甚至实现受损细胞及其碎片与完整活细胞的分离。Percoll主要由表面包被单层乙烯吡咯烷酮(PVP)的硅胶颗粒组成,直径15-30 nm,游离PVP的含量仅占1-2%。由于颗粒大小的异质化,离心过程以不同的速率沉淀,自发产生一个匀质化且等渗的梯度,密度在1.0-1.3 g/ml之间。大部分沉淀系数>60S的生物颗粒都可以用Percoll实现分离。
本品是无菌的溶液,呈无色至浅黄色,具有以下几大特点,
1)Percoll形成的梯度密度范围在1.0-1.3 g/ml之间,整个梯度体系都是等渗的;
2)无细胞毒性,化学惰性,不会粘附到细胞膜上;
3)可调节至生理离子强度和pH;
4)温和条件分离细胞,亚细胞颗粒和较大病毒(低至~70S),可保持其活力和形态完整性;
5)只需角转头中速离心即可实现预成梯度或者自发形成梯度分离;
6)Percoll粘度低(10±5 cP at 20℃),能够快速形成梯度和颗粒分离;采用预制梯度分离低速离心力(200-1000×g)仅需数分至数十分钟即可达到满意的分离结果;
7)Percoll稳定性高,未开封的产品室温保存5年有效;开封的产品室温无菌保存至少2年有效;
8)Percoll(未稀释)可重新高压灭菌,120℃,30min;
注意事项
1)Percoll分离推荐使用聚碳酸酯(PC)离心管;Percoll离心后常有二氧化硅颗粒聚集在管底,或者分层时聚集在管壁上。干燥后这些沉淀较难去除,因此建议使用后立即用水冲洗所用设备。
2)Percoll在pH 5.5-10之间性能不受任何干扰。但低于pH 5.5会发生胶凝。二价阳离子也会引起胶凝,而温度升高会加剧此现象发生。
3)只有不含盐离子或蔗糖的Percoll(原液)才能高压灭菌。因为盐离子会引起胶凝,而蔗糖会引起焦糖化。高压灭菌过程尽量减少与空气接触,避免在percoll/空气层间形成固体颗粒,可通过将percoll装在窄口瓶内来避免。如果颗粒已经形成,通过过滤或者低速离心的方式去除。灭菌后溶液的损失可加入相应体积的蒸馏水补足,密度不会受影响。Percoll不可用滤膜除菌。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:4-30℃,有效期5年