淋巴细胞分离液(Lymphocyte Separation Medium,简称LSM)是一种无菌的即用型分离液,基于Böyum的Ficoll-甲泛影钠溶液做过一些改良,使得操作简单快速且分离效率更高。每100 ml淋巴细胞分离液中含有6.2 g 聚蔗糖(Ficoll)和9.4 g 泛影酸钠,20℃下的密度为1.0770-1.0800 g/ml。不仅适用于外周血淋巴细胞,也可分离其他组织来源的淋巴细胞,包括脐带血和骨髓细胞。
工作原理
去纤维蛋白或肝素化人血以1:1的比例用生理盐水或平衡盐溶液稀释,加在分离液上层,之后低速离心30 min。在离心过程中,差速迁移使其最终形成几个细胞分层。聚集在管底的颗粒主要是红细胞和多形核粒细胞,通过梯度迁移至管底。根据其密度的大小,淋巴细胞和其他单个核细胞如单核细胞,以及血小板分布在血浆和LSM两层之间。淋巴细胞可以通过吸取分界层溶液回收,并通过进一步清洗来去除血小板,LSM和血浆。