本试剂盒适用于测定哺乳动物组织、细胞caspase-1活性。测定原理基于Caspase-1特异水解其多肽底物N-acetyl-Tyr-Val-Ala-Asp-pNA(Ac-YVAD-pNA),释放出游离的硝基苯胺pNA,后者呈黄色在405nm具有最大吸收峰,用可见光分光光度比色方法测定。其吸光度值对应于Caspase-1的水解活性。
细胞凋亡属于程序化细胞死亡,可见于各种器官和细胞,在正常发育、生理、病理过程中对细胞和器官的稳态具有十分重要的调节作用。Caspase(Cysteine-requiring Aspartate Protease)是参与细胞凋亡过程的蛋白酶家族,包含10多个成员。其中Caspase-1是唯一可剪切IL-1b和IL-18前体产生活性细胞因子的caspase。Caspase-11剪切45kD的caspase-1前体蛋白产生20kD和10kD片断,这两个片断可以形成异源二聚体,并进一步形成四聚体。此四聚体具有蛋白酶活性。Caspase-1通过剪切Bcl-XL调节细胞凋亡,并通过对细胞因子前体的剪切来调控相关细胞因子介导的免疫炎性反应。
运输及保存:试剂常温运输。到达后按要求储存,1年内稳定。
所需仪器:酶标仪与96孔酶标板;或可见光分光光度计配100μl容积的石英比色杯。
工作波长:最大吸收波长405nm,如不具备也可在400~450nm范围内测定,但灵敏度略降。