本试剂盒适用于测定哺乳动物组织、细胞caspase-5活性。试剂盒测定原理基于Caspase-5特异水解其多肽底物N-acetyl-Trp-Glu-His-Asp-p-nitroanilide(Ac-WEHD-pNA),释放出游离的硝基苯胺pNA,后者呈黄色在405nm具有最大吸收峰,用可见光分光光度比色方法测定,吸光度值对应于Caspase-5的水解活性。
细胞凋亡属于程序化细胞死亡,可见于各种器官和细胞,在正常发育、生理、病理过程中对细胞和器官的稳态具有十分重要的调节作用。Caspase(Cysteine-requiring Aspartate Protease)是参与细胞凋亡过程的蛋白酶家族,包含10多个成员。Caspase-5分子量47.7kD,与ICE有51%的同源性,在过量表达时可诱导凋亡发生。
所需仪器:酶标仪与96孔酶标板;或可见光分光光度计配100μl容积的石英比色杯。
工作波长:最大吸收波长405nm,如不具备也可在400~450nm范围内测定。