检测原理:细胞在发生凋亡时,会在生理生化和细胞形态上发生一系列变化,在凋亡中晚期,激活的DNA内切酶会切断核小体间的基因组DNA,DNA会被降解成为约180bp-200bp 的片段,而正常或者增殖细胞很少发生DNA断裂。利用这个差异,用脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT 酶)把FITC标记的dUTP标记到断裂DNA片段的3'-OH 末端,然后进行荧光显微镜或流式细胞仪检测,这个方法被称为TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法细胞凋亡检测。
产品优势和特点:TUNEL细胞凋亡检测试剂盒,集成了不同厂家产品的诸多特长,形成独特优势和特点:
· 高活性的重组TdT突变体酶----该转移酶的比活是其他试剂盒里TdT活力的10倍,同样情况下,不被标记的3'-OH 末端可以顺利标记上荧光,因此检测灵敏度更高;
· 经反复优化的标记反应底物----降低了荧光基团相邻后可能造成聚集和淬灭的效果,从而提高检测灵敏度,同时减少非特异性反应;
· 更精确的实验数据----试剂盒提供的PI 核染料,可以将全部标记和未标记细胞的DNA 着色,并在488nm波长激发光下发出红色荧光,从而得以判断凋亡细胞占总细胞比例;
· 一步染色,使用方便----只需一步染色反应,染色完成后洗涤即可观察,约1-2个小时即可完成;
· 应用范围广----既可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况,也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。
检测方法:荧光显微镜或流式细胞仪
样本类型:石蜡包埋组织切片、组织冰冻切片、细胞涂片以及细胞悬液
保存条件:-20°非无霜冰箱中,避免反复冻融。