正常细胞/膜损伤细胞染色试剂盒是采用Calcein-AM/7-AAD 双染细胞的方法染色活细胞和膜损伤细胞(死细胞)。
Calcein-AM 是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂,Calcein-AM 由于在Calcein的基础上加强了疏水性,因此能够轻易穿透活细胞膜。当其进入到细胞质后,酯酶会将其水解为Calcein 留在细胞内,发出强绿色荧光。与其它同类试剂(如BCECF-AM和Carboxy-fluorescein diacetate)相比,Calcein-AM 是最适合作为荧光探针去染活细胞的,因为它的细胞毒性很低。Calcein的激发和发射波长分别为490 nm和515 nm。Calcein -AM仅对活细胞染色。
7-AAD 是一种非渗透性荧光染料,作为核染色染料的7-AAD 不能穿过正常活细胞的细胞膜,但可穿透膜损伤细胞如晚期凋亡细胞或者坏死细胞的细胞膜,它穿过死细胞膜的无序区域而到达细胞核,并嵌入细胞的DNA 上,形成具有高荧光性的加成物,从而产生红色荧光(激发:488,545nm,发射:647 nm),因此7-AAD仅对膜损伤的死细胞染色。可以用来检测膜损伤的无活性的细胞。
由于Calcein和7-AAD-DNA都可被490 nm激发,因此可用荧光显微镜同时观察活细胞和膜损伤细胞。用545 nm 激发,仅可观察到膜损伤细胞。
储存条件:染料-20℃避光保存;避免反复冻融;稀释液2-8℃保存。
有效期:六个月