保存条件：-20℃冰冻保存一年。

工作原理：

在机体内部随时都在发生着细胞的死亡。传统上用显微镜来观察细胞的死亡，其特征为核染色质的浓缩及碎片的形成。但是这种现象出现的很晚，时间也很短暂。凋亡的特征是内 源性核酸内切酶被激活，细胞自身的染色质或DNA 被切割，出现单链或双链缺口，并产生 与 DNA 断点数目相同的3’-OH 末端。末端脱氧核糖核酸转移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase)可以将地高辛标记的dUTP(DIG-dUTP)标记至 3’-OH 末端，DIG-dUTP 结 合在 DNA 断点部位，可以通过生物标记的抗地高辛抗体(Anti-DIG-Biotin)反应后，再结合 链酶亲和素-荧光素 CY3(SABC-CY3)。Cy3 在 554nm 激化，在 568-574nm 发射荧光，呈鲜红色，从而可以在显微镜下观察到着色的凋亡细胞。

试剂盒内容：

1．标记缓冲液(Labeling Buffer)1ml

2．末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT,×20)20μl

3．DIG-dUTP(×20)20μl

4．封闭液(Blocking Reagent)4ml

5．生物素化抗地高辛抗体(× 100)20μl

6．SABC-CY3(× 100)20μl

7．Proteinase K(×200)50μl

8 抗体稀释液 4ml

阳性对照片 2 张

用户自备试剂

1．多聚赖氨酸或APES。

2．0.01M TBS,PH7.5(配法:1L 双蒸馏水中加入 8.5 克氯化钠,1.2 克 Tris和0.45—0.5ml 纯 乙酸。)

3．DAPI 染色液

4．水溶性封片剂或抗荧光衰减封片剂。