Rhodamine 123 (罗丹明123, Rh 123)是一种常用的阳离子绿色荧光染料,可以透过细胞膜从而在活细胞线粒体内聚集,并发出黄绿色荧光。广泛用作检测线粒体膜电位的荧光探针,并且对细胞没有任何毒性。
CAS:62669-70-9
分子式:C21H17ClN2O3
分子量:380.82
纯度:≥98%(HPLC)
储存条件:-20℃避光,有效期一年
使用方法
1. 用载玻片准备细胞。细胞数目应为 5×104~5×105个/mL。
2. 孵育该载玻片,用 PBS或Hank’s 液洗涤细胞。
3. 用培养基稀释 Rh123母液以制备 1~20µM Rh123缓冲液。具体工作浓度取决于细胞类型和细胞浓度。
4. 将 Rh123缓冲液加入载玻片并在37℃下孵育 30 分钟至 1 小时。
5. 去除 Rh123 缓冲液并用培养基洗涤细胞(洗涤细胞后为了固定,加入 10%福尔马林缓冲液并孵育 15~20 分钟,接着用 PBS洗涤)。
6. 用带有荧光素滤光片的荧光显微镜观察细胞。