保存条件:-20℃冰冻保存一年。
工作原理:
在机体内部随时都在发生着细胞的死亡。传统上用显微镜来观察细胞的死亡,其特征为核染色质的浓缩及碎片的形成。但是这种现象出现的很晚,时间也很短暂。凋亡的特征是内源性核酸内切酶被激活
,细胞自身的染色质或DNA 被切割,出现单链或双链缺口,并产生与 DNA 断点数目相同的3’-OH 末端。末端脱氧核糖核酸转移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase)可以将地高辛标记的
dUTP(DIG-dUTP)标记至 3’-OH 末端,DIG-dUTP 结合在 DNA 断点部位,可以通过生物标记的抗地高辛抗体(Anti-DIG-Biotin)反应后,再结合链酶亲和素-过氧化物酶(SABC),然后加入显色底物
DAB 予以显示。凋亡的细包核呈黄色,从而可以在显微镜下观察到着色的凋亡细胞。
试剂盒内容:
1.标记缓冲液(Labeling Buffer)5ml
2.末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT,×20)100μl
3.DIG-dUTP(×20)100μl
4.封闭液(Blocking Reagent)20ml
5.生物素化抗地高辛抗体(×100)100μl
6.SABC(×100)100μl
7.Proteinase K(×200)250μl
8.抗体稀释液 20ml