Caspase 3,即Cysteine-requiring Aspartate Protease 3,也称CPP32、Yama或apopain,属于Caspase家族的CED-3亚家族(CED-3 subfamily),系一种在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶,也是哺乳动物细胞中研究最多的一个Caspase。 Caspase 3可以剪切procaspase 3、6、7和9,且可以直接特异性剪切多种Caspase底物,包括PARP(poly(ADP-ribose)polymerase)、ICAD(Inhibitor of caspase-activated deoxyribonuclease)、gelsolin和fodrin等。这些由Caspase 3介导的蛋白剪切是细胞凋亡分子机制的重要组成部分。另外,caspase 3在细胞核凋亡和细胞起泡(Cell blebbing)过程中也起到了关键作用,包括染色质固缩(chromatin condensention),DNA片段化(DNA fragmentation)等。
Caspase 3 Assay Kit, Colorimetric是一款简单快速检测细胞或组织内Casepase 3活性的试剂盒,其检测原理是基于Casepase 3可以催化底物Ac-DEVD-pNA(acetyl-Asp-Glu-Val-Asp p-nitroanilide)产生黄色的pNA(p-nitroaniline),pNA在405nm附近有强吸收,从而可以通过测定吸光度来检测Caspase 3的活性(黄色产物与Caspase 3酶的活性成正比)。 另外,本试剂盒中还提供了Caspase 3催化产生的黄色产物pNA,以此作为定量caspase 3酶活性的标准品。
试剂盒组份:
Lysis Buffer裂解液————8ml
Assay Buffer检测缓冲液——8ml
Ac-DEVD-pNA(2mM)—————200μl
pNA(10mM)————————200μl
注意事项
1)建议Ac-DEVD- pNA分装保存,尽量避免反复冻融;
2)pNA(中文名为4-硝基苯胺)有毒,请注意小心防护。pNA(10mM)在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
3)有报道少数类型细胞凋亡检测不到Caspase 3 的激活;
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:-20℃