本试剂盒应用范围广,可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况,也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。
细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180-200bp的DNA ladder。
TUNEL (TdT mediated dUTP Nick End Labeling) 细胞凋亡检测试剂盒(Alexa Fluor 647)可以用来检测组织细胞在凋亡晚期过程中细胞核DNA的断裂情况。其原理是在末端脱氧核糖核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)的作用下,在基因组DNA断裂时暴露出的3'-羟基(3'-OH)末端掺入Alexa Fluor 647-12-dUTP,从而可以用荧光显微镜或流式细胞仪检测。Alexa Fluor 647为红色荧光染料,具有很高的稳定性和很强的亮度。
试剂盒组份:
5×Equilibration Buffer——————————1.25 ml
Alexa Fluor 647-12-dUTP Labeling Mix———100 μl
Recombinant TdT Enzyme——————————20 μl
Proteinase K(2 mg/ml)———————————40 μl
注意事项
1) 需自备用于洗涤细胞的PBS,用于封片的抗荧光淬灭封片液,用于固定的4%多聚甲醛。
2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:-20℃,有效期一年。