本试剂盒应用范围广,可用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况,也可检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。
细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180-200bp的DNA ladder。
TUNEL (TdT mediated dUTP Nick End Labeling) 细胞凋亡检测试剂盒(Alexa Fluor 488)可以用来检测组织细胞在凋亡晚期过程中细胞核DNA的断裂情况。其原理是在末端脱氧核糖核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)的作用下,在基因组DNA断裂时暴露出的3'-羟基(3'-OH)末端掺入Alexa Fluor 488-12-dUTP,从而可以用荧光显微镜或流式细胞仪检测。
Alexa Fluor 488染料稳定性更高,信号更强,从而使标记物更亮,抗淬灭能力更强。
试剂盒组份:
5×Equilibration Buffer ——————————750μl
Alexa Fluor 488-12-dUTP Labeling Mix————100 μl
Recombinant TdT Enzyme ——————————20 μl
Proteinase K(2 mg/ml)——————————— 40 μl
DNase I (1 U/μl)————————————— 5μl
10×DNase I Buffer with MgCl2—————— 100 μl
注意事项
1)需自备用于洗涤细胞的PBS,用于封片的抗荧光淬灭封片液,用于固定的4%多聚甲醛。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:-20℃,有效期一年。