本试剂盒是采用分光光度法检测细胞或组织裂解液中caspase 4酶活性或纯化的caspase 4酶活性的试剂盒。本试剂盒用酶标仪检测或容量不超过100μl的分光光度检测杯检测时,除标准曲线外可以检测20个样品。
Caspase是一个在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 4有时被写作caspase-4或caspase 4,可以和Apaf-1相互作用并参与细胞色素c导致的caspase 3激活。Caspase 4也可以和caspase 14相互作用。
本Caspase 4活性检测试剂盒是基于caspase 4可以催化底物Ac-LEVD-pNA(acetyl-Leu-Glu-Val-Asp p-nitroanilide)产生黄色的pNA(p-nitroaniline),从而可以通过测定吸光度来检测caspase 4的活性。pNA在405nm附近有强吸收。
试剂盒中提供了caspase 4催化产生的黄色产物pNA,可以作为定量caspase 4酶活性的标准品。
试剂盒组分:
裂解液——————8ml
检测缓冲液——————8ml
Ac-LEVD-pNA(2mM)———200μl
pNA(10mM)——————200μl
注意事项:
1. 须自备可以测定A405或A400的酶标仪或容量不超过100μl的分光光度检测杯及相应分光光度计。优先考虑测定A405,如有困难可以测定A400。
2. Ac-LEVD-pNA需尽量避免反复冻融,请注意适当分装。
3. 测定蛋白浓度需Bradford蛋白浓度测定试剂盒(YT034),可向百奥莱博订购。建议样品用水稀释1倍后再用Bradford法测定蛋白浓度,以降低DTT对蛋白浓度测定的干扰。
4. pNA(中文名为4-硝基苯胺)有毒,请注意小心防护。pNA(10mM)在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
5. 本试剂盒的裂解液可以和百奥莱博的其它caspase活性检测试剂盒的裂解液通用,即本试剂盒裂解液制备的蛋白样品可以用于百奥莱博其它caspase活性检测试剂盒的检测。
储存条件:-20℃。
Caspase 4 活性检测试剂盒细胞生物学研究有以下几个方面。
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。