本试剂盒是采用分光光度法检测细胞或组织裂解液中caspase 3酶活性或纯化的caspase 3酶活性的试剂盒。本试剂盒用酶标仪检测或容量不超过100μl的分光光度检测杯检测时，除标准曲线外可以检测20个样品。

Caspase是一个在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 3也称CPP32、Yama或apopain，有时被写作caspase-3或caspase 3，属于caspase家族的CED-3亚家族(CED-3 subfamily)，是细胞凋亡过程中的一个关键酶。Caspase 3是哺乳动物细胞中研究最多的一个caspase。Caspase 3可以剪切procaspase 3、6、7和9，并可以直接特异性剪切许多caspase底物，包括PARP(poly(ADP-ribose)polymerase)，ICAD(Inhibitor of caspase-activated deoxyribonuclease)，gelsolin和fodrin等。这些由caspase 3介导的蛋白剪切是细胞凋亡分子机制的重要组成部分。另外，caspase 3在细胞核凋亡过程中也起到了关键作用，包括染色质固缩(chromatin condensention)，DNA片段化(DNA fragmentation)等。同时caspase 3对细胞起泡(cell blebbing)也起到关键作用。

本Caspase 3 活性检测试剂盒是基于caspase 3可以催化底物Ac-DEVD-pNA(acetyl-Asp-Glu-Val-Asp p-nitroanilide)产生黄色的pNA(p-nitroaniline)，从而可以通过测定吸光度来检测caspase 3的活性。pNA在405nm附近有强吸收。

试剂盒中提供了caspase 3催化产生的黄色产物pNA，可以作为定量caspase 3酶活性的标准品。

试剂盒组分：

裂解液——————8ml

检测缓冲液——————8ml

Ac-DEVD-pNA(2mM)———200μl

pNA(10mM)——————200μl

注意事项：

1. 须自备可以测定A405或A400的酶标仪或容量不超过100μl的分光光度检测杯及相应分光光度计。优先考虑测定A405，如有困难可以测定A400。

2. Ac-DEVD-pNA需尽量避免反复冻融，请注意适当分装。

3. 测定蛋白浓度需Bradford蛋白浓度测定试剂盒(YT034)，可向百奥莱博订购。建议样品用水稀释1倍后再用Bradford法测定蛋白浓度，以降低DTT对蛋白浓度测定的干扰。

4. pNA(中文名为4-硝基苯胺)有毒，请注意小心防护。pNA(10mM)在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。

5. 本试剂盒的裂解液可以和百奥莱博的其它caspase活性检测试剂盒的裂解液通用，即本试剂盒裂解液制备的蛋白样品可以用于百奥莱博其它caspase活性检测试剂盒的检测。

Caspase 3 活性检测试剂盒细胞生物学研究有以下几个方面。

细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。