本试剂盒提供了一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。对于待检测的细胞或组织样品，经过生物素标记和后续的DAB显色等步骤，即可在普通光学显微镜下观察到凋亡细胞。本试剂盒足够检测20个样品。

试剂盒组分：

TdT酶———————————40μl

Biotin-dUTP————————960μl

TdT酶稀释液(选用)—————500μl

Streptavidin-HRP——————22μl

Streptavidin-HRP稀释液———1ml

DAB显色液A————————6ml

DAB显色液B————————6ml

标记反应终止液——————6ml

细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时，暴露的3'-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)的催化下加上生物素(Biotin)标记的dUTP(Biotin-dUTP)，随后和辣根过氧化物酶(HRP)标记的Streptavidin(Streptavidin-HRP)结合，最后在HRP的催化下通过DAB显色来显示凋亡细胞，从而可以通过普通光学显微镜检测到凋亡的细胞，这就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理。

本试剂盒有如下优点：

(1)高灵敏度：背景染色极低，阳性染色强，可以在单细胞水平检测到细胞凋亡，同时由于凋亡早期就有DNA断裂，可以检测到早期的细胞凋亡。

(2)特异性好：TUNEL检测时通常更容易标记凋亡细胞，而不容易标记坏死细胞。

(3)快速：仅需约2-3个小时即可完成。

(4)应用范围广：可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况，也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。

TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂，但不会检测出射线等诱导的DNA断裂(和细胞凋亡时的断裂方式不同)。这样一方面可以把凋亡和坏死区分开，另一方面也不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。

极少数细胞凋亡时没有DNA断裂，此时不适用TUNEL法检测。在个别类型的坏死细胞中也发现TUNEL检测呈阳性。在需要严格判断细胞凋亡的情况下，最好同时检测多个凋亡指标。

注意事项：

1.需自备用于洗涤细胞的PBS或HBSS，用于封片的抗荧光淬灭封片液(YT097)等适当的封片液，用于固定的4%多聚甲醛或向百奥莱博订购免疫染色固定液(YT086)，同时需自备含0.1%Triton X-100的PBS或向百奥莱博订购免疫染色洗涤液(YT089)。需自备过氧化氢，除石蜡切片外需自备甲醇。

2.如果用于石蜡切片的检测，需自备蛋白酶K，二甲苯。

储存条件：-20℃。

TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(显色法)细胞生物学研究有以下几个方面。

细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。