本试剂盒是用PE(藻红蛋白标记的重组人Annexin V来检测细胞凋亡时出现在细胞膜表面的磷酯酰丝氨酸的一种细胞凋亡检测试剂盒。一个包装的本试剂盒共可以检测20个样品。可以使用流式细胞 仪、荧光显微镜或其它荧光检测设备进行检测。本试剂盒检测的是红色荧光,因此在待检测的细胞已经表达GFP等绿色荧光蛋白的情况下,特别适合使用本试剂盒检测细胞凋亡。PE可以被495nm、545或564nm的激发光所激发,发出峰值为575nm的荧光。Annexin是一类广泛分布于真核细胞细胞浆内钙离子依赖的磷酯结合蛋白,参与细胞内的信号转导。但仅Annexin V被报道可以调控一些PKC的活性。Annexin V选择性结合磷酯酰丝氨酸(phosphatidylserine,简称PS)。磷酯酰丝氨酸主要分布在细胞膜内侧,即与细胞浆相邻的一侧。在细胞发生凋亡的早期,不同类型的细胞都会把磷酯酰丝氨酸外翻到细胞表面,即细胞膜外侧。磷酯酰丝氨酸暴露到细胞表面后会促进凝血和炎症反应。而Annexin V和外翻到细胞表面的磷酯酰丝氨酸结合后可以阻断磷酯酰丝氨酸的促凝血和促炎症反应活性。用带有红色荧光的荧光探针PE标记的Annexin V,即Annexin V-PE,就可以用流式细胞仪或荧光显微镜非常简单而直接地检测到磷酯酰丝氨酸的外翻这一细胞凋亡的重要特征。正常细胞不会被Annexin V-PE所染色,凋亡细胞和坏死细胞都会被Annexin V-PE所染色。如果希望进一步区分凋亡和坏死细胞,可以使用其它细胞凋亡检测试剂盒进行检测。注意事项:1. 如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。2. 染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。3. 如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,最终导致染色失败。4. 荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。储存条件:4℃避光,有效期6个月。
Annexin V-PE细胞凋亡检测试剂盒细胞生物学研究有以下几个方面。
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。