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生化试剂 > 酶类 > T4 DNA连接酶
产品名称:
T4 DNA连接酶
型号:
CS-RT2962
生产地址
进口、国产
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产品简介
产品名称:T4 DNA连接酶
产品详情

一、概述:

产品属性:

产品名称:T4 DNA连接酶
英文名称:T4 DNA Ligase

CAS号:9015-85-4 编号:CS-RT2962

产品名称

T4 DNA连接酶

英文名称

T4 DNA Ligase

CAS

9015-85-4

包装

可根据客户要求大包装订制

编号

CS-RT2962

 

品介绍:

英文名称:T4 DNA Ligase

CAS号:9015-85-4

分子量:55.3kDa,单体

级别:BR

来源:含有T4噬菌体克隆基因30的大肠杆菌

活性定义:是指在ATP-PPi交换反应中,37℃30分钟内将1nmol [32PPi]转换为Norit可吸收形式所需的酶量(weiss单位,1weiss单位相当于约200个粘性末端连接单位。1个粘性末端连接单位:20ul反应体系(50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)5-DNA末端)中,在16℃30分钟内连接50%连接HindIII酶切的Lambda DNA 产物所需的酶量)

抑制剂:当反应体系中NaC1KC1的浓度超过200 mM时,可强烈抑制T4 DNA Ligase活性

失活:65℃加热10分钟或70℃加热5分钟

注意:T4 DNA LigaseDNA结合会改变条带的琼脂糖凝胶电泳迁移率,为避免此现象,电泳前需处理样本或分子量标准。样本处理如下:样本与Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液(#R1151)混合,75℃加热5分钟或65℃加热10分钟后冰浴保存;转化时,连接产物的体积不得超过感受态细胞体积中的10%;电转化之前,先用氯方抽提方法除去连接混合物中的T4 DNA Ligase,然后经乙醇沉淀纯化抽提产物

质量控制:测试表明无内切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能检测:粘性末端或平末端DNA的连接能力

性状(以下信息仅供参考):液体。该酶催化双链DNARNA中毗邻的5'磷酸基团和3'-羟基末端之间形成磷酸二酯键,还可以修复双链DNARNADNA/RNA复合体中的单链切口,连接DNA的粘性和平末端,但该酶对单链核酸无酶活性。该酶需要辅因子ATP

用途:本品仅供科研,不得用于其它用途。(以下用途仅供参考)粘性末端或平末端双链DNA的连接;双链寡核苷酸接头与双链DNA连接;双链DNARNADNA-RNA复合体中缺口的修复;连接酶介导的RNA检测;位点特异性突变;扩增片段长度多态性

保存: -20°C

标签:生化试剂 

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